非洲猪瘟实验室检测操作规范及注意事项

发布时间2019-08-16        浏览次数：1136

    由于屠宰企业、养殖场、食品企业等核酸（非洲猪瘟病毒）检测实验室的普及，核酸污染将会是非洲猪瘟病毒检测过程中的常见问题。本文总结了实验前的准备、实验过程、实验结束后处理，确保实验室洁净，防止交叉污染，保证样品检验结果准确可靠。
    一、实验前的准备
    1、根据待检样品检查相应设备，提前一天准备检验试验需要的试剂和耗材。
    2、缓冲间要准备好专用工作服，实验室里要准备好一次性口罩、无菌手套、带有滤芯的专用吸头、含有20%的84消毒液的废液杯和废液桶、卫生纸等。
    3、进行检验试验前30分钟，实验室的墙面、地面用浸泡了5%的84消毒液的抹布或拖布擦拭清洁，实验室的台面用75%的酒精擦拭清洁。
    4、进行检验试验前30分钟，开启生物安全柜紫外灯照射。
    二、实验过程
    1、操作前佩戴一次性口罩、手套，穿专用工作服。手套和生物安全柜内喷洒核酸祛除剂或5%的84消毒液。
    2、装有移液器吸头的吸头盒必须保持关闭状态，避免吸完阳性对照的吸头经过打开的吸头盒。
    3、先加阴性对照，并盖上盖子，然后加PCR待检核酸后加阳性对照，必要时设置试验后阴性对照以验证实验操作假阳性。
    4、整个操作过程都要戴手套进行，一旦发现有污染风险必须换手套并喷洒核酸祛除剂或20%的84消毒剂。
    5、操作过程中的废吸头、废弃物品、被污染物品集中装于带有20%的84消毒液的废液缸内，且物品要浸泡于液体中。
    三、试验结束后的处理
    1、试验结束后，将所有用20%的84消毒液处理过的废吸头、废弃物品、被污染物品、扩增结束的PCR管等集中装于密封塑料袋内密封，外表喷洒10%的84消毒液，传出实验室。实验室外将废物和废液分别处理。
    2、生物安全柜操作结束后使用核酸祛除剂进行擦拭，不得遗漏每个角落，通风运行10分钟以抽出污染气溶胶，然后柜内开启紫外灯照射30分钟，每次实验结束清洁一次。
    3、实验室内墙面、地面使用10%的84消毒液进行擦拭，每天工作结束清洁一次。
    4、实验室内耗材和仪器未经处理不得移出。

    5、专用工作服不得随便穿出实验室，且每周将工作服浸泡2%的84消毒液并清洗一次。