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非洲猪瘟检测荧光定量PCR仪检测过程中需注意的事项

发布时间2019-03-06        浏览次数:1158

    非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触性动物传染病,临床上以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征,易感猪群的病死率高达。动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。而且,非洲猪瘟病毒也是《禁止生物武器公约》清单中列入的核查动物病原体。目前,针对非洲猪瘟防控,尚无有效的商品化疫苗,防控重点是做好生物安全管理和早期诊断扑杀净化。非洲猪瘟检测荧光定量PCR仪在整个检测过程中发挥着重要的作用。
    为了确保结果准确性,仪器的使用方法一定要正确。所用到的试剂盒的操作,也是不能马虎的,下面,我们来看看非洲猪瘟检测荧光定量PCR仪检测过程中需注意的事项。
    整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
    为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
    每次实验应该设置阴、阳性对照。
    试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
    试剂盒内所配阴性和阳性对照在次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
    为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
    仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
    非洲猪瘟检测荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
    实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。